電気機械的穿孔法(エレクトロメカニカルポレーション)による細胞への分⼦導⼊促進

〜電界誘起気泡の挙動制御が細胞の遺伝⼦操作に貢献〜

ポイント

・誘電体で覆われた微細電極からなるコアシェル構造(注1)のバブルインジェクターを応⽤し、前例のないエレクトロメカニカルポレーションを提案し、指向性電界誘起気泡(注2)の⽣物医⼯学へのユーザビリティを例証しました。
・細胞懸濁液の粘度を調整し、マイクロバブルを繰り返し膨張・収縮させることで、細胞への遺伝⼦導⼊を促進させ、さまざまな種類の細胞に⼤きな分⼦を導⼊することに成功しました。
・本操作技術は、創薬研究・遺伝⼦⼯学・流体医⼯学など、多くの分野での貢献が期待されます。

概要

 九州大学大学院工学研究院の黄文敬特任助教、佐久間臣耶准教授、鳥取直友助教、山西陽子教授、産業技術総合研究所生物プロセス研究部門の菅野茂夫主任研究員らの研究グループは、電界により誘起される気泡を制御して、細胞に力学刺激を与えることで、効率的に細胞膜に穿孔し、数メガダルトン(注3)の分子を細胞へ導入することに成功しました。
 細胞膜穿孔技術は、細胞内で発現した生体分子の活性を可視化するだけでなく、遺伝子操作を可能にする技術でもあります。しかしながら、巨大なゲノム情報を持ちうる大きな分子を細胞へ導入することは困難です。本研究では、この技術を見直すことで、誘電体材料で覆われた微細電極からなるコアシェル構造のマイクロバブルインジェクター(下図)を用いて、エレクトロメカニカルポレーションで細胞に穿孔をつくり、巨大なゲノム情報を持つ大きな分子を細胞へ導入できることを示しました。電極にパルス電圧を印加することで、電極の先端にマイクロバブルが発生し、細胞に電気と機械的刺激を同時に与えることができるようになりました。このような独創的な手法を用いることで、一般に分子の導入が困難とされている骨芽細胞やクラミドモナスにも、数メガダルトンの分子を導入することを可能にしました。特に、細胞懸濁液の粘度を高めること(下図B)で導入効率が向上することを見いだし、これは電界誘起気泡の繰り返しの膨張・収縮(振動波)によって達成されたと推定されます(下図)。さまざまな種類の細胞への適用が可能であることから、新たな遺伝子工学への応用が数多く期待されます。
 本研究は、2022年10月20日(日本時間)に英国王立化学会の科学ジャーナル「Lab on a Chip」に掲載されました。

用語解説

注1)コアシェル構造:テフロンチューブにタングステンワイヤーを挿入した構造
注2)指向性電界誘起気泡:電気により発生する真っ直ぐに進む気泡のこと
注3)メガダルトン: 原子や分子の質量を表す慣用的に使われる単位で、質量数12の炭素原子、12Cの1/12を1ダルトンとしたとき、その106 倍の単位

詳細

詳細はプレスリリースをご参照ください。

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